欢迎访问文稿网!

免疫组织化学染色

范文之家 分享 时间: 加入收藏 我要投稿 点赞

免疫组织化学染色

    

    免疫组织化学染色是应用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。与免疫荧光相比设备简单、结构清晰、易于保存。

    (一)具体步骤

    1.石蜡切片常规脱蜡入水。

    2.入3%的H2O24℃孵育10min,消除内源性过氧化物酶的活性。

    3.入PBS洗,加0.05%胰酶37℃20min或采用微波抗原修复。

    4.入PBS洗,血清室温封闭,10~20min。

    5.加一抗室温或4℃过夜。

    6.入PBS洗,加生物素标记的二抗工作液室温20~40min。

    7.入PBS洗,加辣根酶标记链酶卵白素工作液室温20~40min。

    8.入PBS洗,显色剂DAB发色5~10min。

    9.自来水洗,复染,梯度乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片(图3-13)。

    

图3-13 肾小管上皮细胞胞浆内TGF-β1阳性表达(×200)

    参考文献

    [1]Xu G,Wu D.Chen X,et al.Generation of mouse anti-human urate anion exchanger antibody by genetic immunization and its identification.Chin Med J,2005,118:627-632.

    [2]Zhang W,Chen X,Shi S,et al.Expression and activation of STAT3 in chronic proliferative immune complex glomerulonephritis and the effect of fosinopril.Nephrol Dial Transplant,2005,20:892-901.

    [3]Xu G,Chen X,Wu D,et al.Development of High-specificity Antibodies against Renal Urate Transporters Using Genetic Immunization.J Biochem Mol Biol,2006,39:696-702.

    [4]Jiang H,Zhu H,Chen X,et al.TIMP-1 Transgenic Mice Recover From Diabetes Induced by Multiple Low-Dose Streptozotocin.Diabetes,2007,56:49-56.

    [5]Tu X,Chen X,Xie Y,et al.Anti-inflammatory Renoprotective Effect of Clopidogrel and Irbesartan in Chronic Renal Injury.J Am Soc Nephrol,2008,19:77-83.

    [6]李建军,陈香美,顾玥,等.复方肾华片对5/6肾切除大鼠肾组织巨噬细胞移行抑制因子的影响.中国中西医结合杂志,2005,25:150-153.

221381
领取福利

微信扫码领取福利

微信扫码分享