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卵泡闭锁与间质腺

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卵泡闭锁与间质腺

    

    一、卵泡闭锁

    卵泡闭锁是指卵巢不能产生排卵,卵巢内的绝大多数卵泡都不能发育到成熟,更不具排卵的能力。它们在发育中的各个阶段均可发生闭锁。退化后的初级卵泡不留痕迹,初级卵泡退化最多。卵泡的闭锁为卵巢生殖生物学中重要的生理现象,始于胚胎期至出生时卵泡数丢失80%,至青春期卵泡丢失高达95%,实际上女性一生中仅有400~500个卵泡发育成熟与排卵。在新生儿,由于激素的突然断绝,有大量的初级卵泡退缩变为闭锁卵泡,而始基卵泡则很少发生闭锁现象和退化性变。为什么这一个卵细胞被选出来继续减数分裂和排卵,而与之相邻的其他卵细胞却从卵巢中消失,发生闭锁呢?卵泡闭锁的机制十分复杂,迄今无一致看法,研究证实,卵泡闭锁受促性腺激素调节,但确切的调节机制至今尚未明确。

    二、卵泡闭锁的机制

    1.激素调节 理论上讲卵巢中卵泡在相同水平促性腺激素影响下,为什么仅有1~2个卵泡发育成熟排卵,而大多数卵泡闭锁,此可能和细胞水平的自分泌(autocrine)和旁分泌(paracrine)有关,一般认为雄激素可能促使卵泡闭锁,此可能因雄激素抑制颗粒细胞增殖有关。

    2.细胞因子 生长分化因子-9(growth different iation factor-9,GDF-9)是TGF-13家族成员之一,在人类和啮齿类中,存在于除原始卵泡外所有卵泡的卵母细胞中,它能促进颗粒细胞和卵泡膜细胞增殖。有研究表明,GDF-9小鼠卵巢出现卵泡发育受阻于初级卵泡之前,不能继续发育,闭锁卵泡数增加,这可能与GDF-9小鼠中KL高表达,与位于卵母细胞上的受体C-kit结合,使卵母细胞体积增大,卵泡膜细胞和颗粒细胞由于缺乏GDF-9的刺激,增殖受抑制,卵母细胞与周围体细胞发育不协调,最终导致卵母细胞退化,卵泡闭锁。

    卵泡闭锁中,Fas L和Fas是目前研究最多的一对死亡配体-受体,Fas是一种细胞膜内在糖蛋白,Fas L是Ⅱ类膜蛋白,它们存在于人类、大鼠、小鼠、牛和猪卵巢的颗粒细胞中,且在闭锁卵泡中高表达。

    肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)及其受体[DR4(death receptor 4),DR5(death receptor 5),DcRl(decoy receptor 1)]是体内另一对死亡配体-受体,它存在猪卵泡颗粒细胞,其中DcRl与TRAIL有高亲和力。在正常卵泡中,TRAIL,DR4和DR5低表达,DcRl高表达,闭锁卵泡中TRAlL,DR4和DR5合成增加,DcRl消失,推测在正常卵泡中,高亲和力DcRl与TRAIL结合,抑制后者诱导颗粒细胞凋亡,当卵泡闭锁时,颗粒细胞中DcRl含量逐渐减少,最后消失,解除对TRAIL的抑制,TRAIL与DR4,DR5结合,激活细胞表面受体死亡途径。

    Ski蛋白是细胞原癌基因C-ski的产物,存在于大鼠卵巢,闭锁卵泡颗粒细胞中Ski蛋白表达阳性,不存在于生长卵泡中,显示Ski可能于卵泡颗粒细胞凋亡和卵泡选择中起作用。

    3.细胞凋亡 细胞凋亡由Kerr于1972年首先描述,为一种主动的生理过程,需要新合成的蛋白质和DNA参与才能实现。在形态学和发生机制上与细胞死亡(necrosis)有显著的不同。细胞凋亡只影响单个散在的细胞,细胞发生萎缩,核染色质浓缩,形成球状凋亡小体(apoptotic body)。细胞凋亡则为被动过程,常因缺氧、中毒、感染和理化因素引起,常累及成群的细胞,细胞结构常遭破坏,甚至发生细胞溶解。细胞凋亡最显著的特征性变化是细胞内钙/镁依赖性的核酸内切酶(endonuclease)被激活,核内DNA发生断裂(DNA fragmentation),形成许多185~200个碱基大小的DNA片段,在琼脂糖(agarose)凝胶电泳上出现明显的梯状(ladder pattern)DNA.而细胞死亡则出现涂片状(smear pattern)DNA。因此,通过这一简便方法便可检测组织中的细胞凋亡的存在。更灵敏的方法可采用放射性核素标记断裂DNA的3′端,然后再结合电泳或免疫组化技术进行检测。

    卵泡闭锁的特征是颗粒细胞的数目和雄激素的合成减少,同时细胞形态发生变化,包括细胞固缩、核分裂降低、基膜的完整性破坏和白细胞侵入颗粒细胞层等。早期的研究表明,大鼠卵泡和黄体中有钙/镁依赖性DNA内切酶的存在,这种酶可使DNA发生断裂。现已在许多动物的卵巢,尤其是闭锁卵泡的颗粒细胞层检出有明显的细胞凋亡特征性的梯状DNA存在;而正常的囊状和囊状前卵泡则无梯状DNA存在,可见卵泡闭锁与细胞凋亡有密切关系。

    三、间质腺

    小的卵泡闭锁后,逐渐消失,一般不留痕迹。大的卵泡闭锁(如次级卵泡及成熟卵泡),其膜细胞一度肥大,形成不规则的细胞锁或团,散在结缔组织中,称为间质腺。间质腺最后也退化,人类的卵巢中间质腺很少。

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