（一）过碘酸-希夫氏染色（PAS染色）
PAS染色可以显示肾小球内的细胞增生、浸润和系膜基质等，并能很好地显示基底膜，是显示糖原和糖蛋白的基本染色。
1.需要试剂 ①1%过碘酸；②schiff氏液染；③苏木素染液；④氨水。
2.具体染色步骤
（1）切片常规脱蜡入水。
（2）入1%过碘酸氧化10～15min，水洗。
（3）入schiff氏液染10～30min，水洗。
（4）苏木素染细胞核1～2min，水洗。
（5）入1%盐酸乙醇分化数秒，水洗。
（6）氨水返蓝数秒。
（7）流水冲洗，镜下观察细胞核成蓝色，基底膜染成粉红色。
（8）梯度乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片。
3.染色结果 PAS阳性物质（多糖和糖原）呈红色，核呈蓝色（图3-6）。
4.注意事项
（1）组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着色。
（2）Schiff氏液染色的时间需严格控制。时间过长标本基底膜着色过深，时间过短标本基底膜着色淡（图3-7）。
（3）入1%盐酸乙醇分化时间要短，时间长容易使标本退色。
（4）染色后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。
图3-6 PAS染色（×400）
图3-7 PAS染色（×400）（Schiff氏液时间不足，基底膜着色淡）
参考文献
[1]Qiao X,Chen X,Wu D,et al.Mitochondrial Pathway Is Responsible for Aging-Related Increase of Tubular Cell Apoptosis in Renal Ischemia/Reperfusion Injury.J Gerontol A Biol Sci Med Sci,2005,60:830-839.
[2]Zhang X,Chen X,Hong Q,et al.TIMP-1 Promotes Age-Related Renal Fibrosis Through Upregulating ICAM-1 in Human TIMP-1 Transgenic Mice.J Gerontol A Biol Sci Med Sci,2006,61:1130-1143.
（二）六胺银-马松染色（PAM-Masson染色）
PAM-Masson染色能更清晰地显示基底膜、免疫复合物和胶原纤维，免疫复合物的定位更为精确。
1.需要试剂 ①1%过碘酸；②六胺银液；③苏木素染液；④氨水；⑤Masson液；⑥1%亮绿液。
2.具体染色步骤
（1）切片常规脱蜡入水。
（2）入1%过碘酸氧化10～15min，水洗5min。
（3）入六胺银液72℃染30～50min，以显微镜下见基底膜呈黑色即可。
（4）加2%氯化金数滴于组织，5%硫代硫酸钠洗。
（5）苏木素染细胞核1～2min，1%盐酸乙醇分化，氨水返蓝。
（6）入Masson液约10min，1%醋酸洗。
（7）入1%亮绿5～8min，1%醋酸洗。
（8）梯度乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片。
3.染色结果 基底膜及系膜基质黑色，免疫复合物红色（图3-8）。
4.注意事项
（1）组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着色。
（2）染色时间与室温和切片厚度有关，室温低、切片厚需染色时间长，反则需染色时间短。入六胺银液染色的时间需严格控制。时间过长基底膜着色过深，时间过短基底膜着色淡（图3-9）。
（3）2%氯化金分化时间要短，时间长容易使银染退色。
（4）染色后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。
图3-8 正常PAM-Masson套染色（×400）
图3-9 PAM-Masson套染色（×400）（银染时间过长，Masson套染时着色不良）
参考文献
[1]尹忠，师锁柱，张雪光，等.大鼠肾组织PAM染色法改良[J].军医进修学院学，2004,25:271.
[2]尹忠，师锁柱，张雪光，等.肾活检病理组织切片PAM-Masson染色法改良[J].中国中西医结合肾病杂志，2008,9:859.
（三）马松染色（Masson染色）
Masson染色能显示各部位的免疫复合物，肾小球硬化和肾间质纤维化程度。
1.需要试剂 ①苏木素染液；②氨水；③Masson液；④1%亮绿液。
2.具体染色步骤
（1）切片常规脱蜡入水。
（2）媒染剂（10%重铬酸钾、10%三氯醋酸等量混合）染10～30min，水洗。
（3）苏木素染细胞核1～2min，水洗。
（4）入1%盐酸乙醇分化数秒，水洗，氨水返蓝数秒，水洗。
（5）入Masson液约10min，水洗，1%醋酸洗。
（6）入2.5%磷钨酸约30s，水洗，1%醋酸洗。
（7）入2%橘黄G约2min，水洗，1%醋酸洗。
（8）入1%亮绿5～8min，1%醋酸洗。
（9）入100%乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片。
3.染色结果 细胞核红色，胶原纤维绿色，免疫复合物红色（图3-10）。
4.注意事项
（1）组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着色。
（2）入Masson液染色的时间需严格控制。时间过长着色过深，时间过短着色淡（图3-11）。
（3）入1%亮绿染色时间需要镜下控制，时间长容易覆盖Masson液红色。
（4）染色后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。
图3-10 正常Masson染色（×400）
图3-11 Masson染色（×400）（Masson染色时间不足，经色淡）
参考文献
[1]Zhang Y,Chen X,Wu D,et al.Expression of tissue inhibitor of matrix metalloproteinases-1 during aging in rat liver.World J Gastroenterol,2005,11:3696-3700.
[2]Zhang Y,Chen X,Wu D,et al.Expression of tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1 in aging of transgenic mouse liver.Chin Med J,2006,119:504-509.
[3]师锁柱，田月，陈香美，等.微波Masson染色法在肾活检病理诊断中的应用.中华肾脏病学杂志，2002,18:298.
（四）刚果红染色
在肾脏病理染色中，刚果红染色能够将淀粉样物质染成砖红色，是诊断淀粉样变肾病的常用染色方法之一。
1.需要试剂 ①高锰酸钾—硫酸液；②苏木素染液；③氨水；④碱性刚果红液。
2.具体染色步骤
（1）切片常规脱蜡入水。
（2）高锰酸钾-硫酸混合处理3min，水洗。
（3）5%草酸处理3min，水洗。
（4）苏木素染核2min，水洗，蓝化。
（5）碱性刚果红液染10～30min。
（6）入100%乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片。
3.染色结果 细胞核蓝色，淀粉样物质呈砖红色（图3-12）。
图3-12 刚果红染色（×400）
4.注意事项
（1）组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着色。
（2）碱性刚果红液染色时间应该镜下控制，染色液现配现用着色好。
（4）染色后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。
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