(一)722S型分光光度计的使用方法
1．722S型分光光度计的性能指标
波长范围:340～1000nm
波长精度:≤±2nm
波长重复性:≤1nm
光谱带宽:6nm
透射比范围:0．0～199．9%(T)
吸光度范围:－0．3～2．999(A)
浓度显示范围:0～9999(C)
透射比准确度:±0．5%(T)
透射比重复性:0．3%(T)
杂光:＜0．5%(T)(在360nm处，以NaNO2测定)
2．722S型分光光度计的结构简介(附图3和附表9)
附图3 722S型分光光度计的结构
1—液晶显示屏;2—0%T调节按钮，数字下调按钮;3—100%T调节按钮，数字上调按钮;4—模式转换按钮;5—功能按钮;6—模式显示;7—波长调节旋钮;8—波长指示窗;9—样品槽;10—样品移动拉杆
附表9 722S型分光光度计各部分机构及功能
续表
3．仪器的基本操作
(1)预热:为使仪器内部达到热平衡，开机后预热时间不少于30分钟。开机后预热时间少于30分钟时，请注意随时操作置0%(T)、100%(T)，确保测试结果有效。由于仪器检测器(光电管)有一定的使用寿命，应尽量减少对光电管的光照，所以在预热的过程中应打开样品室盖，切断光路。
(2)改变波长:通过旋转波长调节手轮可以改变仪器的波长显示值(顺时针方向旋转波长调节手轮波长显示值增大，逆时针方向旋转则显示值减少)。调节波长时，视线一定要与视窗垂直。
(3)置参比样品和待测样品:首先选择测试用的比色皿;然后把盛好参比样品和待测样品的比色皿放到四槽位样品架内;用样品架拉杆来改变四槽位样品架的位置。当拉杆到位时有定位感，到位时请前后轻轻推拉一下以确保定位正确。
(4)置0%(T):该步骤的目的是校正读数标尺的零位，配合置100%(T)进入正确测试状态。分光光度计的检测器是其以光电效应的原理，但当没有光照射到检测器上时，也会有微弱的电流产生(暗电流)，调0%T主要用于消除这部分电流对实验结果的影响。一般在改变测试波长时或者是测试一段时间后要进行0%的调节。
具体的操作如下:首先检视透射比指示灯是否亮。若不亮则按MODE键，点亮透射比指示灯。然后打开样品室盖，切断光路(或将黑体置入四槽位样品架中，用样品架拉杆来改变四槽位样品架的位置，使黑体遮断光路)后，按“0%ADJ”键即能自动置0%(T)，一次未到位可加按一次。
(5)置100%(T):该步骤的目的是校正读数标尺的零位，配合置0%(T)进入正确测试状态。一般在改变测试波长时或者是测试一段时间后进行。
具体操作如下:将用作参比的样品置入样品室光路中，关闭掀盖后按“100%ADJ”键即能自动置100%(T)，一次未到位可加按一次。置100%(T)时，仪器的自动增益系统调节可能会影响0%(T)，调整后请检查0%(T)，若有变化请重复调整0%(T)。
由于溶液对光的吸收具有加和效应，溶液的溶剂及溶液中的其他成分对任何波长的光都会有或多或少的吸收，这样都会影响测试结果的可靠性，所以应设置参比样品以消除这些因素的影响。参比样品应根据测试样品的具体情况进行科学合理的设置。
(6)改变操作模式:本仪器设置有四种操作模式，开机时仪器的初始状态设定在透射比操作模式。分别为透射比，即测试透射比;吸光度，即测试吸光度;浓度因子，即设定浓度因子;浓度直读，即测试浓度和浓度直读。
4．应用操作
(1)测定溶液的透射比
①预热→②设定波长→③置参比样品和待测样品→④置0%(T)→⑤置100%(T)→⑥选择透射比操作模式→⑦拉动拉杆，使待测样品进入光路→⑧记录测试数据
(2)测定溶液的吸光度
①预热→②设定波长→③置参比样品和待测样品→④置0%(T)→⑤置100%(T)→⑥选择吸光度操作模式→⑦拉动拉杆，使待测样品进入光路→⑧记录测试数据
(3)测定样品的T-λ(透射比-波长)曲线
在要求测量的波长范围内以合适的波长间隔逐点按测定样品透射比的步骤重复执行，并将各波长对应的透射比标记在方格纸上，即呈现该材料的T-λ(透射比-波长)曲线。
(4)运用A-C(吸光度-浓度)标准曲线测定物质浓度
①按照分析规程配制不同浓度的标准样品溶液并记录→②按分析规程配制标准参比溶液→③预热，改变波长，置参比样品和待测样品，置0%(T)，置100%(T)→④选择吸光度操作模式→⑤测出不同浓度的标准溶液和待测样品对应的吸光度，并记录各数组→⑥根据不同浓度的标准溶液对应的吸光度数组手工绘制C-A曲线，或运用仪器的RS232C接口配合仪器的专用软件拟合出C-A曲线→⑦根据待测样品吸光度，在C-A曲线上找出对应的浓度。
(5)浓度直读应用
当分析对象比较稳定且其标准曲线基本过原点的情况下，用户不必采用较复杂的标准曲线法检测待测样品的浓度，而可直接采用浓度直读法做定量检测。
要求:待测溶液的浓度大概在标准样品浓度的2/3左右。操作步骤如下:
①测出待测样品和标准样品的吸光度→②选择测试浓度操作模式→③设定浓度直读为标准含量或含量值的10n倍→④浓度值=显示值×10n倍，记录测试数据
(6)浓度因子功能应用
按“浓度直读”执行前3步后、置浓度因子操作模式，在数值显示窗中将显示这一标准样品的浓度因子，记录该浓度因子数值，则在下次测试同一种样品时，开机后不必重新测量标准样品的浓度因子，而只需直接重新输入该浓度因子数值，即可直接对待测样品进行浓度直读来测定浓度。操作步骤如下:
①预热，校正波长准确度，改变波长，置参比样品和待测样品，置0%(T)，置100%(T)→②置浓度因子操作模式→③设定浓度因子为已测得的浓度因子值→④置浓度直读操作模式→⑤记录待测样品浓度
5．仪器日常维护
(1)清洁仪器外表宜用温水，切忌使用乙醇、乙醚、丙酮等有机溶液，用软布和温水轻擦表面即可擦净。必要时，可用洗洁精擦洗表面污点，但必须即刻用清水擦净。仪器不使用时，请用防尘罩保护。
(2)波长范围由定位机构限定，旋转波长调节手轮至短波端335nm和长波端1000nm时，调准为止，切勿用力过大，以免损坏限位机构(为确保仪器工作于标定波长范围，本机短波端限位在332nm附近，长波端限位在1003nm附近)。
6．比色皿的使用
(1)比色皿要配对使用，因为相同规格的比色皿仍有或多或少的差异，致使光通过比色溶液时，吸收情况将有所不同。
(2)注意保护比色皿的透光面，拿取时，手指应捏住其毛玻璃的两面，以免沾污或磨损透光面。
(3)在已配对的比色皿上，于毛玻璃面上做好记号，使其中一支专置参比溶液，另一支专置试液。同时还应注意比色皿放入比色皿槽架时应有固定朝向。
(4)如果试液是易挥发的有机溶剂，则应加盖后，放入比色皿槽架上。
(5)凡含有腐蚀玻璃的物质的溶液，不得长时间盛放在比色皿中。
(6)倒入溶液前，应先用该溶液淋洗比色皿内壁三次，倒入量不可过多，以比色皿高度的4/5为宜。
(7)每次使用完毕后，应用蒸馏水仔细淋洗，并以吸水性好的软纸吸干外壁水珠，放回比色皿盒内。
(8)不能用强碱或强氧化剂浸洗比色皿，而应用稀盐酸或有机溶剂，再用水洗涤，最后用蒸馏水淋洗三次。
(9)不得在火焰或电炉上进行加热或烘烤比色皿。
(10)若发现比色皿被玷污时，可以用洗液清洗，也可用20W的玻璃仪器清洗超声波清洗半小时，一般都能解决问题。
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