血清总甘油三酯测定（－法）

    实验十五　血清总甘油三酯测定（GPO－PAP法）

    一、实验目的与要求

    1．了解血清中甘油三酯测定在人体营养学上的意义及其生理学上的重要性。

    2．掌握血清中甘油三酯测定方法及722型分光光度计或半自动生化分析仪的使用方法。

    二、实验原理

    

    紫色醌亚胺色泽强度与甘油三酯含量成比例，在546nm波长处比色可求得TG含量。

    三、实验仪器与试剂

    1．本实验所用仪器

    （1）AT－648自动生化分析仪；

    （2）四孔恒温水浴锅。

    2．分组及仪器　2人一组，每组仪器包括：

    （1）试管架1个；

    （2）2ml试管10个；

    （3）10μl微量加样器1个；

    （4）1ml移液管1个；

    （5）2ml移液管2个；

    （6）洗耳球1个；

    （7）搪瓷盘1个；

    （8）微量加样滴头；

    （9）吸水纸。

    3．试剂

    （1）甘油激酶　　　　　　　≥2kU／L

    （2）脂蛋白酯酶　　　　　　≥3kU／L

    （3）甘油磷酸氧化酶　　　　≥3kU／L

    （4）过氧化物酶　　　　　　≥2kU／L

    （5）ATP　　　　　　　　　 ≥0．5mmol／L

    （6）TOOS　　　　　　　　　≥1mmol／L

    （7）Good’s缓冲液　　　　 pH　7．0

    （8）4－氨基安替吡啉　　　 ≥0．5mmol／L

    （9）稳定剂　　　　　　　　适量

    （10）生理盐水　　　　　　 适量

    四、实验方法与步骤

    1．于一系列试管中，按下表加入各溶液

    

    表15－1　系列反应管中各管所加溶液

    

    2．混合，置37℃水浴保温5min。

    3．于波长546nm以空白校零，读取各管吸光度（A）

    五、实验结果与分析

    

    六、实验报告

    参照《营养学》、《生物化学》原理分析。

    七、注意事项

    1．试剂为空白对照；

    2．每组样品做2～3个平行；

    3．正常参考范围：0．565～1．695mmol／L（50～150mg／dl）。